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高中生物：光合色素的提取和分离和探究环境因素对光合作用的影响

高考就要来了，随着时间的越来越近，同学们，有没有感到很紧张？今年高考还是要考理综和文综的，你都准备好了吗？高中生物，是理综三大巨头之一，生物这个分数是万万不能丢的，因为其他同学都将近拿了满分，你准备拿多少分？高中生物学习很难吗？“光合色素的提取和分离”和“探究环境因素对光合作用的影响”这些你都弄明白了吗？老师为你整理了高中生物：光合色素的提取和分离和探究环境因素对光合作用的影响，希望能够帮助到你！

知识点1：光合色素的提取和分离

1.实验原理：叶绿体中的色素能溶解于有机溶剂中，可用酒精提取叶绿体中的色素。

叶绿体中的四种色素在层析液中的扩散速度不同，层析液的主要成分是石油醚，叶绿体中的四种色素在石油醚中的溶解度不同：溶解度最高的是胡萝卜素，它随层析液在滤纸上扩散得最快；叶黄素和叶绿素a的溶解度次之；叶绿素b的溶解度最低，扩散得最慢。这样，几分钟后，四种色素就在扩散过程中分离开来。

2.材料用具：新鲜的绿色叶片（如菠菜叶片）；干燥的定性滤纸，烧杯（100mL），研钵，小玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺，量筒（10mL），天平；酒精，层析液，二氧化硅，碳酸钙。

3.方法步骤：

a.研磨：称取5g绿色叶片，剪碎，放入研钵中。加入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入5mL酒精，进行迅速、充分的研磨，研磨成匀浆。

思考：（1）加入少许二氧化硅和碳酸钙、酒精的目的分别是什么？

（二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；碳酸钙的作用是防止叶绿素被破坏，保护叶绿素不分解；酒精用来溶解提取叶绿体中的色素。）

（2）叶肉细胞的结构应破坏到什么程度，才能使色素溶解到酒精中？

（至少应使叶肉细胞的叶绿体的类囊体薄膜破裂）

b.过滤：将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中（漏斗基部放一块单层尼龙布）进行过滤。将滤液收集到一个小试管中，及时用棉塞将试管口塞紧。

思考：为什么要用棉塞将试管口塞紧？

（避免酒精挥发）

c.分离叶绿体中的色素

（1）制备滤纸条：取一干燥的定性滤纸，将滤纸剪成长10cm、宽1cm的滤纸条，在距滤纸条一端1cm处用铅笔画一条横线。

（2）画滤液细线：用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画一条细而直的滤液细线。待滤液干后，重复2-3次。

（3）分离色素：将2mL层析液倒入烧杯中，将制备好的滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微斜靠着烧杯的内壁轻轻插入到层析液中，注意：不能让滤液细线触到层析液。用培养皿盖盖上烧杯。

思考：为什么不能让滤液细线触到层析液？

（不能将滤液细线浸没在层析液中，是因为色素易溶解于层析液中，导致色素带不清晰。）

（4）观察实验结果：最后滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素从上到下分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。

注意：

①画滤液细线时注意细，匀，直，浓。先用铅笔轻轻地画一道线，防止色素带重叠，用提取液反复画好几次，每次画完后尽量吹干，不要弄破纸条。用铅笔可以画得整齐些，这样可让每一种色素都有共同的起点。

②层析液是挥发性较强的有机溶剂，并且具有一定的毒性，所以在操作中要尽量用培养皿盖盖住烧杯口。